色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成,是裝填有固定相用以分離混合組分的柱管,多為金屬或玻璃制作,有直管形、盤(pán)管形、U形管等形狀。色譜柱可分為填充柱和開(kāi)管柱兩大類,液相色譜通常均采用填充柱,色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及
色譜柱的制備和操作條件。
誤區(qū)1、空氣會(huì)*損壞一根HPLC色譜柱
當(dāng)色譜柱不與色譜儀連接的時(shí)候,用戶需確保色譜柱被緊緊地密封。事實(shí)上,實(shí)際的應(yīng)用中是,即使柱的端部進(jìn)入了少量的空氣也不要緊。因?yàn)楫?dāng)你將色譜柱連接到色譜儀上使用時(shí),在系統(tǒng)初始加壓階段,在很短的時(shí)間內(nèi)空氣就會(huì)被溶劑沖刷掉。所以,不要因?yàn)樯V柱進(jìn)入了空氣而認(rèn)定色譜柱已被損壞。
誤區(qū)2、所有的C18(L1)色譜柱都是一樣的
由于C18色譜柱是一種廣泛應(yīng)用的色譜柱,故該系統(tǒng)將其稱為“L1”。事實(shí)證明這個(gè)系統(tǒng)是不可靠的,是一個(gè)令人困惑的系統(tǒng)。
因?yàn)槊糠N商品化的C18色譜柱,雖然同樣是選用硅膠作為基體,但各自都有自己特定的填料鍵合合成工藝,因此色譜性能也不相同。
比如兩種C18柱表現(xiàn)的色譜性能不同,后者C18固定相的鍵合比例大于前者。較低的固定相鍵合比率,表面未反應(yīng)的硅醇基較多,有時(shí)混合保留機(jī)理起主要作用。
誤區(qū)3、反相色譜柱不可以使用純水相
這個(gè)誤解其實(shí)是起源于有些用戶在使用低有機(jī)溶劑含量或者純水作為反相色譜柱的流動(dòng)相時(shí),發(fā)生了俗稱相塌陷的現(xiàn)象,所以大家就認(rèn)為反相色譜柱不可以使用純水相。
然而,事實(shí)上市售的反相色譜柱(如極性嵌入和極性封端柱)都是具有水浸潤(rùn)性的,其表面特性是允許使用純水的,而不會(huì)導(dǎo)致塌陷或者保留時(shí)間移位。