尺寸排阻色譜法(SEC)是根據(jù)溶液中分子的大小分離化合物的,在柱子的填料中較大的分子會(huì)被較細(xì)的小孔排除在外。尺寸排阻色譜是根據(jù)溶液中分子量大小分離的,其保留時(shí)間取決于溶質(zhì)分子進(jìn)出固定相孔結(jié)構(gòu)的相對(duì)滲透度。
尺寸排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3μm硅膠作為填料。3μm的粒徑結(jié)合大的孔體積使其成為目前分辨率優(yōu)良的體積排阻柱。表面鍵合技術(shù)保證了填料表面鍵合的很大化,使其具有高的化學(xué)穩(wěn)定性及小的非特異性吸附。尺寸排阻色譜柱體積排阻柱有100、150及300三種孔徑選擇,廣泛的應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離與分析。
尺寸排阻色譜柱多次使用后某些樣品可能會(huì)吸附到入口篩板或填料上,當(dāng)積累至一定程度時(shí)會(huì)出現(xiàn)壓力升高并伴隨峰型展寬的現(xiàn)象,此時(shí)需要清洗色譜柱。一般流程為:斷開(kāi)檢測(cè)器,反接色譜柱,在低于50%較大推薦流速下用清洗液沖洗10-15倍柱體積。